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描述

補(bǔ)體溶血活性是補(bǔ)體系統(tǒng)在血漿或血清中的經(jīng)典或替代途徑的功能測試。替代途徑方法（AP50）基于在Mg++存在下裂解兔紅細(xì)胞。當(dāng)懷疑補(bǔ)體耗竭或缺乏時，作為篩查試驗(yàn)是有幫助的。該測試對途徑任何組成部分的減少、缺失和/或不活動很敏感。

該方法也適用于評估藥物對補(bǔ)體成分抑制或消耗的影響。此外，根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)ISO 10993-4：2017，可以評估血液，血漿或血清與生物材料接觸后的生物材料和醫(yī)療器械的血液相容性。生物材料或藥物激活補(bǔ)體系統(tǒng)會導(dǎo)致補(bǔ)體蛋白的消耗，從而降低AP50水平。

應(yīng)用

測量替代途徑補(bǔ)充活性。可以分析來自以下物種的血漿或血清樣品：人，豚鼠，小鼠，倉鼠，大鼠，牛，豬，綿羊，恒河猴分枝桿菌和比格犬。該試劑盒僅供實(shí)驗(yàn)室研究使用，不適用于診斷或治療程序。

原則

將紅細(xì)胞懸浮液與連續(xù)稀釋的血清或血漿在30°C下孵育37分鐘。 補(bǔ)體系統(tǒng)的激活將導(dǎo)致溶血。孵育后，將樣品離心以獲得上清液。上清液中的游離血紅蛋白濃度與補(bǔ)體活性成正比，通過分光光度計在415nm波長處測量。將血漿的稀釋因子與溶血程度作圖可以計算AP50（即血漿的稀釋以獲得50%的紅細(xì)胞裂解）。

正參比是裂解液誘導(dǎo)的總裂解，負(fù)參比是用稀釋緩沖液孵育后獲得的。

該試劑盒設(shè)計用于通過小樣品（75 μL）的替代途徑確定補(bǔ)體活性，并且可以在96孔（圓底）微孔板中進(jìn)行。該測定也可以在微量離心管中進(jìn)行。